Приготовление желточно солевого агара на blocoautocad.com

Таблетки для похудения

Приготовление желточно солевого агара

приготовление желточно солевого агара


Приготовление желточно солевого агара - Кровяной агар. Приготовление среды. В качестве основы используют сухой питательный агар. К расплавленному и охлажденному до 45 град. Смесь тщательно перемешивают, чтобы не образовалось пены, и разливают в стерильные чашки Петри, предварительно подогретые в термостате, слоем мм.

Быстрый переход:

Фуксин основной кристаллический – 10 г

На желточно-солевом агаре обнаруживается лецитовителлазная активность ЛецА способность разрушать лецитовителлин яичного желтка испытуемых микроорганизмов. Результат оценивается после 24 часовой инкубации в термостате приготовление желточно солевого агара 37 0 С по образованию вокруг колоний зоны помутнения с радужным венчиком. Учитывают в отраженном свете. АЛА — секреторный фактор персистенции. Изучают АЛА по методике О. Бухарина с соавт. После застывания среды на подсушенную поверхность наносят каплю 1 млрд. Тарасевича чувствительной к литическому действия лизоцима.

приготовление желточно солевого агара
Фото: приготовление желточно солевого агара

Медицина Об УНИФИКАЦИИ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ -Здоровье

На бульоне через ч — помутнение, на агаре-правильной формы выпуклые непрозрачные колонии средних или мелких размеров. Специальные среды сахарные, кровяныена кровяном агаре образует колонии в виде паучков с зоной гемолиза. Тетаноспазмин -спастическое действие непроизвольное сокращение поперечно-полосатых мышц из-за поражения синапсов. Животные, у которых С. При травмах особенно, обширных сельскохозяйственных, огнестрельных с загрязнением частицами почвы. В течение часов свертывают молоко, вызывают помутнение и бурное газообразование на среде Китта-Тароцци или средах с углеводами. В организме несколько трепонем могут покрываться общей полисахаридной оболочкой, образуя покоящиеся формы цисты.

Кафедра Микробиологии СПбГПМУ - Питательные среды

Для приготовления желточной эмульсии на дно стерильной чашки Петри помещают куриное яйцо, тщательно протирают его ватой, смоченной этиловым спиртом, и обжигают. Приготовление желточно солевого агара пинцетом пробивают с двух противоположных сторон яйца два отверстия, через одно из этих отверстий из яйца полностью удаляют белок, а затем, несколько увеличив отверстие, выливают желток в стерильную колбу вместимостью см3. К желтку постепенно добавляют частями по 20—30 см3 см3 стерильного изотонического раствора, содержимое тщательно встряхивают до получения гомогенной массы. Карболовый раствор кристаллического фиолетового или генциан фиолетового 1г кристаллического фиолетового или генциан фиолетового растирают в фарфоровой ступке с 2 г кристаллической карболовой кислоты фенола. Раствор фильтруют через влажный бумажный фильтр.

приготовление желточно солевого агара

Агар элективный солевой

официальный сайт приготовление желточно солевого агара

Растворяют ингредиенты, кипятят, фильтруют, стерилизуют гр. С 20 минут. Затем разливают в стерильные пробирки или чашки Петри. На чашке с агаром видны разнообразные колонии микробов, выросшие в при посеве воздуха. На чашке с МПА видны различные колонии бактерий, отличающиеся по цвету, форме, размерам, прозрачности…. Среда позволяет дифференцировать лецитиназопозитивные стафилококки, вокруг колоний которых образуются зоны помутнения с перламутровым оттенком. Вокруг выросших колоний отчетливо видны прозрачные зоны гемолиза. Содержит питательный агар с лактозой, бриллиантовым зеленым, солями желчных кислот, минеральными солями и индикатором нейтральный красный. Лактозонегативные колонии вырастают бесцветными, лактозопозитивные — красными. На некоторых модификациях среды Плоскирева выявляется еще и способность сальмонелл выделять сероводород: Свежеприготовленная среда бесцветна или имеет бледно-розовую окраску.

При росте лактозоположительных бактерий их колонии окрашиваются в темно-красный цвет с металлическим блеском; лактозоотрицательные кишечные палочки образуют бесцветные колонии. Рост на трехсахарном железосодержащем агаре: Пептический перевар животной ткани, гидролизат казеина, дрожжевой и мясной экстракты являются источником азотистых веществ, серы, микроэлементов, витаминов группы В и др. Лактоза, сахароза и глюкоза — ферментируемые субстраты. Тиосульфат натрия в сочетании с ионами железа являются индикатором на сероводород, феноловый красный — индикатор рН. Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, способствуют образованию многих кислот, изменяющих цвет среды с красного на желтый.

Большее количество кислот освобождается в столбике при ферментации , по сравнению со скошенной частью окисление. Бактерии образуют также щелочные продукты в ходе окислительного декарбоксилирования пептона. Индикатор феноловый красный становится желтым при значениях рН менее 6,8. Щелочные продукты могут нейтрализовать небольшое количество кислоты, образуемое в скошенной части при ферментации глюкозы. Если в ходе ферментации образуется газ, его можно определить по пузырькам и характерным разрывам среды. Некоторые виды бактерий восстанавливают тиосульфат до сероводорода, который, взаимодействуя с ионами железа, образует нерастворимый черный преципитат сульфида железа. Восстановление тиосульфата происходит только в кислой среде и почернение обычно бывает в зоне столбика.

Бактериальную культуру засевают газоном на питательный агар, после чего на его поверхность пинцетом помещают на равномерном расстоянии друг от друга бумажные диски, содержащие определенные дозы разных антибиотиков. Посевы инкубируют при 37 0 С в течение суток. По диаметру зон задержки роста культуры судят о ее чувствительности к соответствующим антибиотикам. При зоне задержки роста до 15 мм культура расценивается как нечувствительная или низко чувствительная, 15 — 24 мм — средняя чувствительность, 25 мм и более — высокочувствительная. Готовая среда непрозрачна, зеленоватого цвета. Содержит глюкозу, неорганические соли, бриллиантовый зеленый, питательный агар.

Бриллиантовый зеленый и висмут подавляют рост грамположительной флоры и многих энтеробактерий, в том числе шигелл, эшерихий. Сальмонеллы при росте на среде выделяют сероводород, который взаимодействует с солями висмута. В результате образуются колонии черного цвета с металлическим оттенком на зеленоватом фоне среды. Среда при рН 7,,4 — бесцветна, при ферментации углеводов приобретает красный цвет.

В пробирки со средой помещают поплавок небольшая трубочка, один конец которой запаян для улавливания газообразных продуктов, образующихся при расщеплении углеводов. Ее используют для культивирования и хранения клостридий. Перед посевом среду прогревают на кипящей водяной бане в течение минут для удаления воздуха. После посева среду заливают небольшим слоем вазелинового масла. Выросшие анаэробы вызывают помутнение питательной среды. На чашку с МПА шпателем выполняется посев суточной бульонной культуры бактерий. Затем наносят каплю известного бактериофага и, наклонив чашку, дают капле несколько растечься по поверхности питательной среды.

Через сутки наблюдают полную задержку роста в месте внесения диагностического фага. Испытуемую суточную бульонную культуру засевают на МПА, затем условно делят чашку на квадраты. В каждый квадрат наносят по одной капле различных фагов. После суточной инкубации в термостате отмечают квадраты, в которых отмечается лизис бактерий. Фаготип бактериальной культуры определяется типом лизирующего ее фага. С одной стороны выполняется посев культуры аэробных бактерий, с другой — умеренно строгих анаэробов.

Чашка закрывается, ее края запаиваются парафином с целью не допустить попадания воздуха, кислорода внутрь чашки. Сначала вырастают в присутствии кислорода аэробы, а затем — анаэробы. В расплавленный и остуженный МПА гр. С добавляют определенный бактериофаг и выливают в чашку Петри. Чашка с полученным агаром делится на несколько секторов, в каждый из которых засеваются неизвестные культуры, выделенные от больных. Там, где культура соответствует бактериофагу, наблюдается отсутствие роста лизис бактерий.

Все содержимое выливают в чашку с МПА. Дают застыть верхнему тонкому слою и ставят в термостат. При встрече фага с бактерией, происходит лизис последней и образуется негативная колония фага. Такие негативные колонии затем подсчитывают для определения титра. Титром фага называют количество фаговых частиц в 1 мл препарата фага.

Чашку с МПА равномерно засевают шпателем суточной бульонной культурой бактерий например, стафилококка. В центр посева помещают дольку чеснока, предварительно измельченного. Инкубируют в термостате. Через сутки отчетливо видна зона отсутствия роста вокруг измельченного чеснока стерильная зона.

приготовление желточно солевого агара

Приготовление желточно солевого агара "желточно-солевой агар" в книгах

Изучение мазков из чистой культуры стафилококка, окрашенных по Граму зарисовать. Могут встречаться единичные кокки или маленькие кучки. В мазке, на фоне клеточного детрита, окрашенного в розовый цвет, видны лейкоциты и грамположительные кокки, расположенные одиночно или небольшими кучками, не образующие капсул. Расположение кокков позволяет предположить длительность заболевания.

Если заболевание свежее, то микробы располагаются внеклеточно, в более поздние сроки болезни можно наблюдать кокки, фагоцитированные лейкоцитами. Посев на кровяном агаре позволяет определить тип гемолизина, выделяемого стафилококками. Гемолитическая активность является одним из признаков патогенности стафилококков. После тщательного перемешивания агар разливают по чашкам. Гемолизин стафилококков вызывает растворение стромы эритроцитов, поэтому вокруг колоний стафилококков, обладающих гемолитической активностью, образуются светлые зоны гемолиза. Штаммы, образующие альфа-гемолизин, вызывают гемолиз кроличьих и бараньих эритроцитов, бета-гемолизин вызывает тепло-холодовой гемолиз только бараньих эритроцитов. Вокруг колоний стафилококков без гемолитической активности кровяной агар не изменен. Изучение характера роста стафилококков на желточно-солевом агаре ЖСА зарисовать. Посев на желточно-солевом агаре проводят для определения лецитовителлазы лецитиназы.

Среда вокруг колоний мутнеет за счет расщепления липовителлина комплекс жира и белка , содержащегося в желтке ферментом лецитиназой. В результате действия фермента от липовителлина отрываются жирные кислоты, степень дисперсности белка уменьшается, происходит преципитация его, что приводит к помутнению среды. Среда вокруг колоний не изменена лецитиназоотрицательные стафилококки. Молочно-солевой агар используют для выделения стафилококков из материала, обильно обсемененного микробами, а также для определения пигмента образуемого стафилококками. Агар тщательно перемешивают с молоком и разливают в чашки. Для лучшего выявления пигмента посевы инкубируют часов при 37 градусах, а затем до 2 суток при комнатной температуре в рассеянном свете.

Изучение лабораторной диагностики стафилококковых инфекций по схеме зарисовать. Микроскопический метод. Метод основан на обнаружении стафилококков при микроскопическом исследовании мазков из материала, которые окрашивают по Граму. Под микроскопом изучают гной, отделяемое ран, слизь и налеты с миндалин и другой материал, содержащий большое количество микробов. Микроскопическое исследование крови не производят, так как кокки в мазках обнаружить не удается. Жидкий материал наносят на предметное стекло пипеткой или петлей. Густой материал растирают на стекле в капле воды, материал с тампона размазывают по стерильному предметному стеклу.

В мазках обнаруживают грамположительные кокки среди лейкоцитов или внутри них. Отмечают степень обсемененности. Определить вид кокков в мазке не всегда удается, поэтому микроскопическое исследование носит ориентировочный характер. Но даже обнаружение в материале типичных по морфологии стафилококков не позволяет поставить диагноз инфекции, потому что присутствие стафилококков в исследуемом материале не всегда является доказательством его этиологической роли, по морфологии невозможно отдифференцировать патогенные стафилококки от непатогенных. Поэтому наряду с микроскопическим исследованием обязательно проводят бактериологическое исследование. Бактериологический метод. Бактериологический диагноз основан на выделении чистой культуры стафилококка путем посева и определения его патогенных свойств. Этот метод используется также для установления источника инфекции факторов передачи инфекции, определения схемы антибактериальной терапии, ее эффективности, контроля за лечением и эпидемическим режимом в лечебных учреждениях.

Важным условием бактериологической диагностики является определение качественных и количественных критериев содержания патогенного стафилококка. Для посева материала выбирают необходимые питательные среды. Стафилококки к питательным средам неприхотливы и способны расти на МПА. Но для повышения высеваемости и возможности провести количественный учет и надежно отличить патогенные стафилококки от непатогенных используют элективные питательные среды. В качестве элективных сред используют молочно-солевой, желточно-солевой агар или молочно-желточно-солевой агар. Для посева материала используют также кровяной агар, который дает возможность определить наличие пигмента и гемолитическую активность.

Однако нужно помнить, что результат исследования наличие гемолитической активности зависит от вида крови, ее концентрации, густоты крови, присутствия и характера сопутствующей флоры. Поэтому использование кровяного агара рекомендуется для первичного посева материала, не содержащего другой микрофлоры. Для оценки обсемененности производят количественный посев материала, готовя из него разведения, и высевают по 0,1 мл из разведений десять во второй, десять в четвертой и десять в шестой степенях.

С тампона засевают цельный материал. Посевы на ЖСА инкубируют в течение 2 суток, а на кровяном агаре — 18—20 часов. Так как ЖСА является элективной средой, то на нем вырастают только колонии стафилококков. Обращают внимание на наличие лецитиназоположительных колоний, подсчитывают их, отбирают колонии для дальнейшего исследования. Если на ЖСА вырастают только лецитиназоотрицательные стафилококки, то из посева тоже отбирают не менее 2 колоний. И лецитиназоположительные и лецитиназоотрицательные стафилококки отсевают на скошенный мясопептонный агар.

После суточного инкубирования выделенную культуру изучают в мазках, окрашенных по Граму, определяя морфологию микробов и чистоту культуры. При наличии в мазке грамположительных кокков, расположенных характерными гроздьями, проводят исследование для идентификации стафилококков. Общими признаками для представителей этого семейства является то, что все они грамположительные кокки. Стафилококки ферментируют маннит в анаэробных условиях табл. Микрококки не ферментируют глюкозу в анаэробных условиях, так как они облигатные аэробы. Дата добавления: Лучшие изречения: На стипендию можно купить что-нибудь, но не больше Но предоставляет возможность бесплатного использования.

Есть нарушение авторского права? Напишите нам Обратная связь. Изучение мазков из гноя, окрашенных по Граму зарисовать В мазке, на фоне клеточного детрита, окрашенного в розовый цвет, видны лейкоциты и грамположительные кокки, расположенные одиночно или небольшими кучками, не образующие капсул. Изучение характера роста стафилококков на кровяном агаре зарисовать Посев на кровяном агаре позволяет определить тип гемолизина, выделяемого стафилококками.

Изучение характера роста стафилококков на желточно-солевом агаре ЖСА зарисовать Посев на желточно-солевом агаре проводят для определения лецитовителлазы лецитиназы.

приготовление желточно солевого агара


Рост стафилококка на желточно-солевом агаре. Студопедия.Нет

Хранят в холодильнике до употребления две недели. Используют как элективную среду для выделения стафилококка. Бычью печень или другие органы можно плаценту нарезают мелкими кусочками, заливают трехкратным количеством МПБ, рН 7,4-? Бульон фильтруют, а печень промывают водопроводной водой, просушивают с помощью фильтровальной бумаги. Распределяют по пробиркам по г печени и по мл МПБ. Стерилизуют 30 мин при 1 атм.


ОТЗЫВЫ: 2 к посту “Приготовление желточно солевого агара

  1. Сбор трав натуральный, без химии. Делается индивидуально для каждого.

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *